El vigilante jurado Larry Daley (Ben Stiller) se ve obligado a decir adiós a todos sus amigos cuando deciden hacer el Museo de Ciencias Naturales más "interactivo" y sustituyen todas las figuras por hologramas. Sus amigos históricos son empaquetados y enviados a los archivos del famoso Smithsonian, en Washington, DC., el museo más grande del mundo. No han pasado ni 24 horas cuando Larry recibe una llamada de Jedediah, el cowboy en miniatura, y descubre que la tabla de Ahkmenrah ha sido extraviada y esto ha hecho que el Smithsonian cobre vida. Para salvar a sus amigos, Larry tendrá que viajar a Washington, DC y luchar contra Kahmunrah, Al Capone, Iván el Terrible y Napoleón que han planeado un complot para apoderarse de la tabla. En medio del caos, Larry hará nuevos amigos, como Amelia Earhart o Albert Einstein que le ayudarán a detener el complot y salvar el museo.
Night At The Museum: Battle Of The Smithsonian — Alan Silvestri
This Night Is Their Last — Alan Silvestri
Daley Devices — Alan Silvestri
I Have Come Back To Life — Alan Silvestri
Finding Jed And The Others — Alan Silvestri
To Washington — Alan Silvestri
Getting Past Security — Alan Silvestri
Octavius Attacks — Alan Silvestri
Gate To The Underworld — Alan Silvestri
Divide The House — Alan Silvestri
Victory Is Ours — Alan Silvestri
More Than a Woman (From "Saturday Night Fever" Soundtrack) — Bee Gees
Cupido canta.
My Heart Will Go On (Love Theme from "Titanic") — Celine Dion
Segunda canción de Cupidos
Let's Groove — Earth, Wind & Fire
Antes de los créditos finales
Fly With Me — Jonas Brothers
Créditos finales
Life In Technicolor — Coldplay
Larry habla con Tess en la reapertura del museo
That's the Way (I Like It) — Auburn University Marching Band & Dr. Richard Good
Bugle Call Rag — Benny Goodman and His Orchestra
Ride of the Valkyries — The Jonas Brothers
Gloriana — London Studio Orchestra and The Purcell Singers
Larry está luchando con Kahmunrah
I Only Have Eyes for You — Harry Warren & Al Dubin & Alan Fernie & Black Dyke Band & Nicholas J. Childs
Blue Moon — Matt Miles & Mark Fletcher & John Pierce & Richard Rodgers & Lorenz Hart